Transformation vs transfektion | Skillnad mellan transformation och transfektion

Transformation vs Transfektion

Transformation och transfektion är två enkla tekniker som används för att introducera en främmande gen i en värdcell. Dessa tekniker beror dock på typen av värd- eller vektorsystem.

Vad är celltransformation?

Transformation är tekniken som används för att introducera gener i jäst- och bakterieceller. Denna teknik orsakar vanligtvis arveliga förändringar i gener, och således är genens uttryck permanent. Den bakteriella omvandlingen introducerades först 1928 av Frederick Griffith. Sedan i början av 1970-talet användes denna teknik i

E. coli. Under omvandlingsprocessen av E. coli, blötläggs cellerna i iskall lösning av CaCl 2 _{. Detta steg gör} E. coli celler kompetenta. Därefter blandas de kompetenta cellerna med plasmid-DNA och inkuberas på is i 20-30 minuter. Då ges en kort värmechock för att möjliggöra överföring av DNA i cellen. Slutligen placeras cellerna i en näringsbuljong och inkuberas vid 37 ° C under 60-90 min för att etablera plasmiderna. När dessa steg framgångsrikt är fullbordade kan de transformerade cellerna placeras på ett lämpligt medium för propagering av celler. Eftersom omvandling anses vara en ineffektiv teknik kan den inte användas för förberedelse av klonbanker.

Vad är celltransfektion?

Transfektion är ett sätt att introducera en främmande gen, vanligtvis i däggdjursceller. Det finns två metoder för transfektion; nämligen transient transfektion och stabil transfektion. Vid transient transfektion är genuttrycket tillgängligt under en begränsad tid; Således orsakar förändringen av gen tillfälligt uttryck. Denna transfektionsmetod är enkel och snabb; Därför kan den användas rutinmässigt. En nackdel med övergående transfektion är svårigheten att applicera för storskaliga proteinsyntessystem.

Under stabil transfektion integreras en målgen i värdcellens genom, och således är genuttrycket permanent, till skillnad från den transienta transfektionen.

Vad är skillnaden mellan transformation och transfektion?

• Transformation är introduktionen av en gen i en prokaryotisk cell (bakterie och jäst), medan transfektion vanligtvis kallas introduktionen av en gen i en däggdjurscell.

• Transformation resulterar i ärftlig förändring, i gener, medan transfektion kan resultera i antingen tillfälligt uttryck eller permanenta förändringar i gener.